穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建
高表達量穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建
與瞬時轉(zhuǎn)染不同,穩(wěn)定細胞株構(gòu)建是指外源基因進入受體細胞并整合到細胞的染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因。穩(wěn)定細胞株有諸多用途,如蛋白抗體生產(chǎn)、信號傳導、藥物靶點研究,免疫治療藥物開發(fā)等,其表達的蛋白/抗體穩(wěn)定性更好和批次差異性更小。
博梵生命提供高表達哺乳動物穩(wěn)定細胞株構(gòu)建服務,篩選過程使用先進的單克隆細胞篩選平臺,較傳統(tǒng)篩選流程快近80天,大大縮短了穩(wěn)定細胞株的開發(fā)周期。
服務流程
基因合成——1周
密碼子優(yōu)化
基因合成
載體構(gòu)建
質(zhì)粒制備
細胞轉(zhuǎn)染——1周
細胞轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化
表達檢測
WB或ELISA
穩(wěn)定細胞系篩選——2∼4周
On-chip篩選
壓力篩選
穩(wěn)定性評估
細胞凍存
交付
優(yōu)選2株穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株
質(zhì)檢報告(CoA)
測序報告.
穩(wěn)定細胞株篩選(研究級)
我們可以在任何細胞的基因組上插入您感興趣的基因,并篩選穩(wěn)定整合的單克隆細胞株。其可應用于多種研究領(lǐng)域,如信號傳導,藥物靶點研究,免疫治療藥物開發(fā)等。博梵生命已經(jīng)在數(shù)十種細胞中成功構(gòu)建細胞系。您只需提供基因序列,我們按照要求完成細胞株的篩選。
服務優(yōu)勢
快速交付,2~3個月,交付穩(wěn)定細胞株;
細胞來源清晰,干凈無污染;
經(jīng)驗豐富,具備豐富的細胞培養(yǎng)經(jīng)驗,熟悉各類細胞的培養(yǎng)方法;
服務說明
1.客戶提供:需提供目的基因序列和宿主細胞(若非常見細胞),并附詳細的細胞培養(yǎng)流程;
2.鑒定方法:我們免費提供gPCR鑒定。同時也可提供Western Blot、ELISA等其他鑒定方法(須另外付費);
CRISPR基因敲除-基因編輯服務
博梵生命提供CRISPR/Cas9基因敲除服務,能夠準確的敲除指定的基因。與傳統(tǒng)的TALEN(轉(zhuǎn)錄激活子樣效應物核酸酶)以及ZNF(鋅指核酸酶)技術(shù)相比,CRISPR技術(shù)能夠低成本地實現(xiàn)高效靈活的基因敲除。您只需提供目的基因序列和細胞,我們就能為您提供高性價比的基因敲除服務,并且定期提供進度報告,服務全程的透明化,讓您放心無憂。
服務優(yōu)勢
高成功率,低脫靶率:多組gRNA設計和驗證,提供脫靶分析和檢測服務;
快速交付,全程透明:~3月交付基因敲除細胞株,定期匯報實驗進度,實驗全程透明化;
一站式服務:博梵生命專注于基因和重組蛋白研究,能夠提供從gRNA設計到蛋白質(zhì)檢測(可選)全過程的實驗服務。
客戶須知:
需提供目的基因序列或序列號,若非常見細胞,則需要提供對應的宿主細胞和培養(yǎng)流程;
我們免費提供目的基因測序鑒定,同時也能夠根據(jù)客戶要求提供Western Blot,脫靶測序鑒定等其他檢測服務(需另外收費)。
服務流程
步驟 |
項目評估 |
Phasel:gRNA載體構(gòu)建 |
Phase Ⅱ:單克隆細胞株篩選 |
流程 |
•細胞分型 •目的基因序列分析 •gRNA靶位點確定 |
•gRNA序列設計 (同時設計3~5組) •gRNA載體構(gòu)建 •gRNA靶點活性檢測 |
•單克隆細胞篩選•擴大培養(yǎng) •測序鑒定 •陽性克隆凍存 |
周期 |
無 |
~2周 |
~10-14周 |
交付 |
無 |
•gRNA序列 |
•單克隆細胞株 •測序檢測報告 •全程實驗報告 |