檢測Asssay（ELISA/Lateral-flow）開發(fā)服務(wù)介紹
- 抗原設(shè)計(jì)：根據(jù)所制備的單克隆抗體（或多克隆抗體）最終使用目的，選取含抗原表面線性優(yōu)勢表位的序列片段用于蛋白表達(dá)純化及免疫，具體過程及結(jié)果請參見附帶的《抗原設(shè)計(jì)報(bào)告》。
- 蛋白表達(dá)及純化：表達(dá)目的蛋白片段及全長蛋白，蛋白量分別不低于5 mg/個(gè)，純度不低于85%。
- 免疫原制備：根據(jù)蛋白的具體特點(diǎn)進(jìn)行一定修飾后，將蛋白與等體積的福氏佐劑混合乳化均勻，成油包水狀態(tài)，以備免疫。
- 小鼠免疫：本項(xiàng)目至少設(shè)計(jì)1個(gè)片段或全長蛋白，分別、單獨(dú)免疫4只小鼠，共計(jì)免疫8只小鼠，取血測試血清ELISA滴度不低于1:20000。
- 新西蘭兔免疫（備選）：用上述蛋白，分別免疫2只兔子，取血測試血清ELISA滴度不低于1：20000。
- 細(xì)胞融合及篩選：脾臟免疫后72 hr，取小鼠脾臟制成單細(xì)胞懸液與SP2/0細(xì)胞進(jìn)行融合。本項(xiàng)目單抗株的篩選都采用間接ELISA法，篩選陽性克隆不低于50個(gè)。
- 腹水誘導(dǎo)及抗體純化：分批挑選陽性克隆細(xì)胞株注射小鼠進(jìn)行腹水誘導(dǎo)，并抽取腹水進(jìn)行抗體純化。
- 配對篩選：對制備得到的所有抗體進(jìn)行HRP標(biāo)記，然后進(jìn)行交叉配對實(shí)驗(yàn)，篩選配對抗體組合。
- 最適抗體配對篩選及驗(yàn)證：使用篩選到的候選配對抗體詳細(xì)調(diào)試包被、標(biāo)記等緩沖體系及反應(yīng)模式，同時(shí)摸索最優(yōu)HRP標(biāo)記條件等，以篩選得到最適抗體配對。
- 酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒（ELISA）開發(fā)：使用最優(yōu)配對抗體進(jìn)行各項(xiàng)分析性能驗(yàn)證、穩(wěn)定性研究和實(shí)際標(biāo)本評價(jià)等；免疫層析試紙條（Lateral flow）開發(fā)：將所篩選到的有活性的抗體進(jìn)行免疫層析平臺驗(yàn)證，篩選，以篩選得到適合免疫層析平臺的抗體配對。
- 結(jié)果交付：ELISA試劑盒(96T)10個(gè)或免疫層析試紙條200條；配對抗體各2 mg；項(xiàng)目技術(shù)報(bào)告（試驗(yàn)方法、試驗(yàn)過程、試驗(yàn)結(jié)果）。
依上述服務(wù)內(nèi)容及交付標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算，周期約為4~6個(gè)月。
