走近羊抗鼠IgG
羊抗小鼠IgG是由小鼠IgG免疫羊制備而來(lái)的,獲得方式如下:
1.免疫小鼠:
為了制備羊抗鼠,首先需要將小鼠注射含有免疫原的混合物,例如純化的重組蛋白或細(xì)胞表達(dá)的蛋白等。通常,這些免疫原是從大量生產(chǎn)的鼠源蛋白中提取的,以獲得足夠的量供制備免疫小鼠使用。
2.收集血清:
接下來(lái),需要收集免疫小鼠所產(chǎn)生的血清,血清中存在著與免疫原結(jié)合的抗體。通常,在注射后的2-3周內(nèi),小鼠的血液中會(huì)出現(xiàn)可檢測(cè)到的抗體水平。
3.分離抗體:
血清中不僅包含特異性抗體,還包含其他非特異性抗體。為了得到純化的特異性抗體,需要分離抗體。可以通過(guò)不同的方法,如鹽析、凝膠過(guò)濾或親和純化等,將特異性抗體從非特異性抗體和其他蛋白質(zhì)中分離出來(lái)。
4.免疫山羊:
最后將免疫小鼠所產(chǎn)生的特異性抗體注射到山羊體內(nèi)。這樣,羊就會(huì)產(chǎn)生反應(yīng)特異性抗體,也就是羊抗鼠IgG。
5.抗體純化:
抗體采用免疫親和層析柱純化。
對(duì)比案例
以相同條件夾心法項(xiàng)目,在大板C線處包被博梵及競(jìng)品兩家羊抗鼠lgG,分別在膠體金法免疫層析和熒光免疫層析上同時(shí)做對(duì)比實(shí)驗(yàn),考察結(jié)合表現(xiàn):
實(shí)驗(yàn)對(duì)比結(jié)果及現(xiàn)象:以相同方法學(xué)在不同微球標(biāo)記方法上,分別測(cè)試本產(chǎn)品與競(jìng)品兩家羊抗鼠lgG,在金標(biāo)免疫層析上跑陰性樣本即可看出C線結(jié)合能力,競(jìng)品并未有本產(chǎn)品條帶深;在熒光免疫層析上兩家均有著隨著陽(yáng)性樣本濃度升高而C線數(shù)值降低的現(xiàn)象,這與所用抗體屬源有關(guān),而單看C值數(shù)據(jù)即可發(fā)現(xiàn)兩組數(shù)據(jù)有著明顯的差別,本產(chǎn)品有著較好的結(jié)合能力;
產(chǎn)品信息