實(shí)驗的紅燈亮起，是否忘記那個“它”
嘿，友友們！實(shí)驗是不是又炸了（假陽/假陰）？明明按照方案來做，理論上是沒有問題的，可報告結(jié)果卻是頻頻“紅燈”。是否忘記了一個好幫手——阻斷劑！那么體外診斷常用的阻斷劑其作用原理是什么？又是如何在體系中消除干擾的呢？且看本文詳解!(建議收藏加關(guān)注）！
新的項目開發(fā)，作為一名研發(fā)人員來說，免疫干擾問題一直是一個繞不開的話題，任何一個免疫檢測方法都有可能受到外源或內(nèi)源性干擾而出現(xiàn)假陽或假陰性的結(jié)果，其中內(nèi)源性干擾往往是由于使用的樣本中有非特異性干擾物質(zhì)（如類風(fēng)濕因子、異嗜性抗體、高脂/黃疸等）所導(dǎo)致的，消除干擾是產(chǎn)品研發(fā)中的重要任務(wù)之一。
據(jù)研究顯示：超過10%的病人體內(nèi)存在內(nèi)源性的人異嗜性抗體，他能結(jié)合血清和血漿中其他物種的免疫球蛋白————美國病理學(xué)家學(xué)會（CAP）
據(jù)研究顯示：10%到40%的病人的樣本，可能會受到HAMA抗體的干擾————Larry Kricka，president，AACC
在夾心法免疫檢測體系中至少使用兩種抗體識別抗原的不同表位，正常情況下捕獲抗體應(yīng)與樣本中的抗原所示濃度成正比，異嗜性抗體在結(jié)合抗原不存在的情況下連接兩種抗體，造成結(jié)果假陽，或會連接二抗，造成結(jié)果假陰。
所以通常這時候就需要阻斷劑來輔助我們的實(shí)驗正常進(jìn)行，確保數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。其阻斷劑分為被動阻斷劑和主動阻斷劑，被動阻斷劑通過物理占據(jù)或競爭結(jié)合非特異性位點(diǎn)，減少干擾物質(zhì)與檢測體系的非特異性結(jié)合。主動阻斷劑通過特異性結(jié)合干擾物質(zhì)，直接中和或封閉其活性位點(diǎn)，使其無法參與反應(yīng)。并且阻斷劑的添加對檢測信號無不良影響，不降低樣本本身信號值，用于各種IVD免疫/生化方法學(xué)。
在膠體金免疫層析法平臺上，依雙抗體夾心法舉例，同等條件下，檢測10份賦值陰性樣本，考察其對部分假陽性樣本的干擾消除效果：
1號：博梵生物
2號：J公司產(chǎn)品
3號：F公司產(chǎn)品
注：實(shí)驗所用樣本均為某知名名牌已賦值的血清樣本；
實(shí)驗結(jié)果：以上述對比實(shí)驗結(jié)果可看出，競品未能有效的使其樣本消除干擾物質(zhì)，檢測線依舊出現(xiàn)條帶；反觀博梵生物阻斷劑可有效阻擋干擾物質(zhì)，檢測線處未形成非特異性結(jié)合條帶；
在熒光免疫層析平臺上，依雙抗體夾心法舉例，同等條件下，檢測50份PCT賦值樣本，對比加與不加阻斷劑對其最終結(jié)果準(zhǔn)確性考察：
注：實(shí)驗所用樣本均為某知名名牌已賦值的血清樣本；
實(shí)驗結(jié)果：測試數(shù)份不同濃度的樣本，以上述對比實(shí)驗結(jié)果可看出，不加阻斷劑出現(xiàn)了假陽性的現(xiàn)象，導(dǎo)致分析數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確性，反觀添加了阻斷劑的對比實(shí)驗，則未出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象，顯示數(shù)據(jù)正常，且不影響其他樣本的本身信號值；
在化學(xué)發(fā)光免疫平臺上，依雙抗體夾心法舉例，同等條件下，檢測50份PCT賦值樣本，對比加與不加阻斷劑對其最終結(jié)果一致性考察：
注：實(shí)驗所用樣本均為某知名名牌已賦值的血清樣本；
實(shí)驗結(jié)果：測試數(shù)份不同濃度的樣本，以上述對比實(shí)驗結(jié)果可看出，不加阻斷劑出現(xiàn)了假陽性的現(xiàn)象，導(dǎo)致數(shù)據(jù)的不準(zhǔn)確性，反觀加了阻斷劑的對比實(shí)驗，則消除了樣本中的干擾物質(zhì)，其數(shù)據(jù)結(jié)果正常，且不影響其他樣本的反應(yīng)結(jié)果。
